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色譜柱的使用壽命的影響因素

更新時間:2012-11-29點擊次數(shù):2264
一、色譜柱篩板問題及對策
  
  色譜柱人口篩板堵塞是色譜柱zui常見的問題之一,篩板堵塞會導(dǎo)致柱壓升高,色譜峰脫尾、塔板數(shù)降低。注射樣品中含有微粒雜質(zhì),zui有可能堵塞色譜柱人口,降低柱壽命,故要在注樣前,將樣品過濾或離心;進樣器與泵密封墊的磨損也會帶來微粒,故可在進樣閥與色譜柱之間用在線過濾器,??杀苊馍V柱濾板堵塞問題。當篩板部分堵塞或進口處填料塌陷形成異常峰形時,可用強溶劑反沖色譜柱(低速)。如不見效,則需更換篩板,或重新填補填料后更換篩板。
  
二、強保留樣品組份影響及控制
  
  強吸附性的樣品組分吸附在柱頭填料上,能嚴重地縮短色譜柱壽命,在分析生物體液時尤為突出。這時,可在色譜柱加一保護柱,能夠有效減少強吸附組分的污染。保護柱(預(yù)柱)是內(nèi)裝填料與分離柱性質(zhì)相近的短柱,接在分離柱之前,可代替流路過濾器。保護柱的作用是吸附強保留組分,收集和阻塞化學(xué)垃圾進人分離柱,這些垃圾如果直接進人分離柱會逐漸堆積在柱頭,zui終降低柱效能。保護柱是消耗品,如分析血漿樣品,一般分析50個樣品后需更換新柱芯。另外,每次分析結(jié)束后可用強溶劑沖洗分離柱(應(yīng)卸下保護柱),以除去可能吸附在分離柱柱頭的污物,有效延長色譜柱的使用壽命。
  
三、化學(xué)影響
  
  在分離過程中色譜柱固定相的流失會顯著降低柱的使用壽命,應(yīng)避免使用對固定相侵蝕性強的固定/流動相組合。短鏈硅烷基基團反相柱穩(wěn)定性zui差在低pH條件下可很快流失有機相,而長鏈烷基反相柱(C18、CS)較穩(wěn)定。


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